由于mRNA獨te的生物學優(yōu)勢受到越來越多的關注，并被用于基因治療領域。湖北省十堰市太和醫(yī)院神經(jīng)外科團隊在研究中篩選了一種安全、高效的轉染試劑，即MIRUS的TransIT-mRNA轉染試劑，該試劑成功實現(xiàn)將合成的mRNA在小鼠大腦進行顱內遞送用于膠質瘤基因治療。該論文發(fā)表于2022年3月的《Molecular Therapy》雜志。

團隊實驗的造模結果表明，使用商業(yè)化的轉染試劑可以成功地將合成的mRNA遞送至大腦，并且TransIT-mRNA顯示出比in vivo jetPEI試劑盒更好的結果，該模型可用于膠質瘤的精確靶向和個性化基因治療。該團隊通過對比實驗表明用in vivo jetPEI或TransIT-mRNA都可成功表達顱內注射的Luc-mRNA，但是TransIT-mRNA轉染試劑的Luc-mRNA的生物熒光信號顯著高于轉染in vivo jetPEI的Luc-mRNA的信號。用TransIT-mRNA轉染試劑注射Luc-mRNA時，熒光素酶的表達時間(60 h)遠高于用in vivo jetPEI注射Luc-mRNA時(36 h)。

圖2. 采用普通轉染試劑轉染的合成mRNA在顱內的表達

（A）使用in vivo jetPEI介導的顱內表達顱內注射合成的Luc mRNA，通過使用N/P=6和N/P=8的IVIS進行檢測，時間點為12h、24h、36h和48h。上面部分顯示的是每個時間點具有代表性的圖像，下面部分表示總結。

（B）使用1 μg和2 μg體系的TransIT- mRNA介導的顱內注射合成的Luc mRNA顱內表達，IVIS進行檢測，時間點為12h、24h、36h、48h、60h和72h。上面部分是每個時間點具有代表性的圖像，下面部分是總結。

（C）兩種轉染試劑的轉染效率比較。用1 μg含TransIT- mRNA或in vivo jetPEI溶液的熒光素酶mRNA進行顱內注射。*p < 0.05；** p< 0.01。

（D）使用熒光顯微鏡進行檢測TransIT- mRNA介導的顱內注射合成的RFP mRNA的顱內表達。

在實驗中證實利用TransIT-mRNA轉染試劑進行mRNA在體顱內給藥是安全的。顱內遞送TRAIL-mRNA的方法能夠成功抑制膠質瘤的生長。而且通過對比實驗結果，清楚地表明TransIT-mRNA在協(xié)助顱內Luc-mRNA遞送方面優(yōu)于jetPEI，可能是在in vivo jetPEI的成分含有陽離子聚合物PEI，PEI的強陽離子電荷導致細胞死亡，對比之下，TransIT-mRNA試劑更安全，無毒。所以顱內注射mRNA首xuan TransIT-mRNA轉染試劑。后續(xù)的小鼠行為學和血液生物化學的指標也驗證了相關試劑顱內應用于mRNA轉染的生物安全性。另外，相關數(shù)據(jù)表明TransIT-mRNA轉染試劑不影響被測試對象的代謝。體外合成的熒光素酶mRNA經(jīng)顱內注射后，經(jīng)常用的TransIT-mRNA轉染試劑包裹后，在小鼠腦內高度表達。 TransIT-mRNA是shi界上di一個用于轉染 mRNA的體外試劑，同時發(fā)現(xiàn)TransIT-mRNA在體內的應用效果也非常好。

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